复方黑面神软膏制备工艺研究.doc

1、复方黑面神软膏制备工艺研究摘要：目的 建立复方黑面神软膏处方黑面神中表儿茶素和苦参中苦参碱含量的测定方法，优化提取工艺条件，并优选以聚乙二醇4000、聚乙二醇400、聚山梨酯80、丙三醇和羟苯乙酯制备复方黑面神软膏的最佳基质配比。 方法 采用HPLC法测定表儿茶素和苦参碱的含量，分别运用正交试验考察浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数对表儿茶素和苦参碱含量的影响。采用L9（34）正交试验法，以软膏的外观性状、延展性、稳定性、稠度和PH等为评价指标，优选基质比例。结果 表儿茶素在0.00840.0336gL-1内线性关系良好，回归方程y=13346x+11.632，r=1.0000，最佳水提工艺

2、：药材加20倍量水浸泡45 min，80温浸提取2次，每次1 h。苦参碱在0.02940.588gL-1内线性关系良好，回归方程y=1714.9x-3.8355，r=0.9999。最佳提取工艺：药材加20倍水浸泡45min，提取两次，每次1h。筛选出来的复方黑面神软膏基质的最佳配比为聚乙二醇4000:聚乙二醇400:聚山梨酯80:丙三醇=（6:1:0.1:0.5）。结论 HPLC法测定复方黑面神软膏处方的含量操作简便，专属性强，准确可靠，可用于复方黑面神软膏的质量控制。优选工艺制备的复方黑面神软膏外观细腻均匀，性状稳定,此最佳基质配比可制备质量较佳的复方黑面神软膏。关键词：复方黑面神软膏；高效

3、液相色谱法；基质；正交试验The Preparation Process Research Of Compound Breynia Fruticosa OintmentAbstract: Objective To establish a method for determining epicatechin and matrine in Compound Breynia fruticosa ointment and optimize the extraction condirions And optimize the optimum proportion of matrix for the pr

4、eparation process of Compound Breynia fruticosa Ointnent by PEG4000 ，PEG400，Tween-80，glycerin and ethylparaben. Methods The content of epicatechin in leaves of Breynia fruticosa and matrine of Separation Flavescens was detemined by using HPLC. Pereating time,ratio of solid to liquid，extraction time

5、and extraction times for the affection of water extraction rate of epicatechin and matrine were detected by the orthogonal test. Character，stability constant，ductility and pH value of the ointment were selected as index，L9( 34 ) orthogonal test was employed to determine the effects of the four facto

6、rsResults The linear range of Epicatechin was 0.00840.0336g/l，the standard curve of Epicatechin was as fbllows y=13346x+11.632，r=1.0000 The optimal water extraction technics were as f01lows： ratio of solid to liquid at 1:20 (wv) and pemeating for 45 minutes， 80 extraction 2 times and 1 hour for each

7、 timeThe linear range of atrine was 0.02940.588gL-1，the standard curve of matrine was as follows y=1714.9x-3.8355，r=0.9999 The optimal decoction extraction technics were as fo1lows： ratio of solid to liquid at 1:20 (wv) and pemeating for 45 minutes，extraction 2 times and 1 hour for each timeThe opti

8、mum proportion of matrix of Compound Breynia fruticosa Ointnent was PEG4OOO-PEG400 -Tween-80- glycerin(6 :1:0.1:0.5)Conclusion HPLC method for determination of epicatechin and matrine is simple and selectiveAnd can be used for quality control of Compound Breynia fruticosa Ointnent.The optimized oint

9、ment was fine uniform，with ductility and stable propertiesWith this optimum proportion of matrix better quality Compound Breynia fruticosa Ointnent can be preparedKeywords: Compound Breynia fruticosa Ointnent，HPLC，Matrix，Orthogonal testI目 录摘要Abstract1 前言12 材料与仪器22.1 仪器22.2 对照品22.3 试剂22.4 样品33 方法与结果3

10、3.1 指标成分含量测定43.2 正交试验73.3 基质配比优选工艺134 讨论144.1 指标成分含量测定分析144.2 基质配比优选工艺分析155 结论15参考文献17综述18致谢251 前言黑面神为大戟科植物黑面神Breynia fruticosa(L.)Hook.f.的干燥全株，2010 版中国药典附录25 以鬼画符收载1。分布在我国南部及云南、贵州、浙江和福建等省，生长于灌木林中，散生山坡、平地旷野灌木丛中，全年可采2。具有“清湿热、化瘀滞”的功效。在临床应用上用于治疗各类皮肤病、治疗慢性支气管炎、治疗各类咬杀等。复方二藤洗剂3（由南蛇藤、忍冬藤、三桠苦、大飞扬、黑面神和虎杖等制成）

11、对掌跖脓疱病有清热解毒，祛斑消疱的功效。福建药物志载曰: “黑面神叶、百部各60 g。水煎冲明矾适量，洗患处治漆过敏，湿疹。”神矾散在现代临床应用中，对于接触性皮炎、皮肤瘙痒证、脚气病、冻疮、湿热隐疹等症有效，尤其对于接触漆或红花油引起的皮肤过敏有特效4。林挺等人5通过醋酸去炎松霜与中药三七洗剂（由黑面神、苦参、七大姑、蛇床子、野菊花、三亚苦、荆芥，白鲜皮和布渣叶等制成）治疗婴儿急性湿疹疗效进行了对比研究，发现二者的总有效率分别达到87.5%和93.5%，证实中药三七洗剂对婴儿急性湿疹有显著疗效。苦参为豆科槐属植物苦参(SophoraflavescensAit.)的干燥根，始载于神农本草经。其

12、味苦、性寒,具有清热燥湿、祛风、杀虫、利尿等功效。用于热痢,便血, 黄疸尿闭, 赤白带下, 阴肿阴痒, 湿疹, 湿疮, 皮肤瘙痒, 疥癣麻风等病症。外用亦治滴虫性阴道炎 6 。大量研究发现,苦参在医疗方面具有抗肿瘤活性、抗肝损伤、抗溃疡、抗生育、抗炎抑菌、抗心率失常、抗病毒以及治疗慢性肝炎等作用7。 苦参还具有抗原虫活性,能抑制致病性皮肤真菌,与百部合用可治甲鱼疥癞、毛霉病等8。张耀龙9报道,苦参碱能抑制角朊细胞增殖,并有抗炎和调节免疫的作用,临床上曾治疗银屑病32例,。由大黄10、连翘、苦参、蛇床子、白屈菜、冰片和赤芍组成的舒肤软膏，功能清热解毒，燥湿止痛，主治疱疹、脓疱疮和湿疹等。另有文献

13、报道11，蛇肤外洗方(主要由三桠苦、地胆头、地肤子、蛇床子、黑面神、漆大姑、金银花叶组成)是广州市名老中医潘仲明的经验方，功效为清热除湿，祛风止痒，与小儿湿疹治则相合，有良好的治疗效果。方中地肤子、蛇床子祛风止痒，黑面神解毒除疮，诸药合用，共奏清热利湿、祛风止痒、解毒除疮之效。根据黑面神和苦参在皮肤病上的显著疗效，本实验拟研制出以黑面神为君药，苦参为臣药，白鲜皮、蛇床子和地肤子为佐药的具有消炎止痒功效的外用制剂复方黑面神软膏。基质主要为水溶性基质聚乙二醇4000，聚乙二醇400和吐温-80等。本课题前期实验者王英晶等人12对黑面神枝叶中表儿茶素含量测定及水提工艺优化进行了研究，采用高效液相色谱

14、法测定黑面神枝叶中表儿茶素含量，运用正交试验考察浸泡时问、加水量、提取时间及提取次数对表儿茶素含量的影响。得出黑面神枝叶水提最佳工艺条件为：药材加20倍量水浸泡45分钟，80温浸提取2次，每次1 小时。本实验对王英晶运用HPLC测定表儿茶素含量的方法进行了验证，并在此基础上采用相似的工艺条件对苦参中苦参碱的含量进行优化，最终配合使用基质制得复方黑面神软膏。2 材料与仪器2.1 仪器1100型高效液相色谱仪AgilentBs224s型电子天平 北京赛多利斯仪器系统有限公司KQ3200E型医用超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司JB-3A 型恒温定时磁力搅拌器上海雷磁创益仪器仪表有限公司TDL-6

15、0B 型台式离心机上海安亭科学仪器厂RE-2000B型旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂SHB-型循环水真空泵 巩义市英峪华中仪器厂DHS16-A多功能红外水分测定仪上海精密科学仪器有限公司2.2 对照品表儿茶素对照品 中国药品生物制品检定所（批号110878-200102）苦参碱对照品 中国药品生物制品检定所（批号110805-200508）2.3 试剂水为屈臣氏蒸馏水；甲醇为色谱纯；聚乙二醇4000，聚乙二醇400，聚山梨酯80，丙三醇，羟苯乙酯为化学纯；其余试剂为分析纯。2.4 样品黑面神枝叶购自广州至信药业有限公司，经广州中医药大学生药鉴定教研室黄海波教授鉴定是大戟科黑面神属植物Breynia fruticosa（L.）Hook.f.的干燥嫩枝叶；苦参（广州至信药业有限公司，批号：140601）；蛇床子（广州至信药业有限公司，批号：150101）；地肤子（亳州市毫广中药饮片有限公司，批号：20120722）；白鲜皮（广州至信药业有限公司，批号：140601）。3 方法与结果 技术流程：L9(34)正交试验，干膏率测定确定苦参碱最佳提取工艺L9(34)正交试验确定表儿茶素最佳提取工艺表儿茶素最佳工艺提取液苦参碱最佳工艺提取液基质