HPLC法同时测定复方盐酸特比萘芬压敏胶贴剂中酮康唑和盐酸特比萘芬的含量.doc

1、HPLC法同时测定复方盐酸特比萘芬压敏胶贴剂中酮康唑和盐酸特比萘芬的含量摘要 目的：建立以高效液相色谱法同时测定盐酸特比萘芬压敏胶贴剂中酮康唑和盐酸特比萘芬含量的方法。方法：色谱柱为Thermo ODS-2 Hypersil柱(4.6mm250mm，5m)，流动相为甲醇-0.03molL-1醋酸铵溶液(84:16)，流速为1.0mLmin-1，检测波长为244nm，柱温为室温。结果：酮康唑和盐酸特比萘芬的浓度分别在8.16081.60gmL-1(r=0.9996)和31.30313.0gmL-1(r=0.9997)范围内与峰面积呈良好的线性关系；平均回收率分别为100.0%和99.3%，RSD

2、分别为2.2%和2.5%。结论：本方法快速简便，重复性好，专属性强，可作为盐酸特比萘芬压敏胶贴剂的质量控制方法之一。关键词：盐酸特比萘芬压敏胶贴剂；酮康唑；盐酸特比萘芬；高效液相色谱法 Simultaneous Determination of Ketoconazole and Terbinafine Hydrochloeide in Terbinafine/Ketoconazole patch by HPLC Abstract ：Objective To establish an HPLC method for the content determination of ketoconazol

3、e and terbinafine hydrochloeide in Terbinafine/Ketoconazole patch. Methods：The analytical was carried out with Thermo ODS-2 Hypersil(4.6mm250mm，5m) column and the mobile phase consisted of methanol-0.03molL-1 ammonium acetate(84:16) as a flow rate of 1.0mLmin-1.The detection wavelength was 244nm. Re

4、sults：The calibration curve was linear within the range of 8.16081.60gmL-1(r=0.9996) and 31.30313.0gmL-1(r=0.9997) for ketoconazole and terbinafine hydrochloeide, respectively. The average recoveries were 100.0%(RSD=2.2%) and 99.3%(RSD=2.5%) for ketoconazole and terbinafine hydrochloeide, respective

5、ly. Conclusion：The method is simple, accurate, reproducible and precise, and applicable for the determination of ketoconazole and terbinafine hydrochloeide in Terbinafine/Ketoconazole patch. Key words Terbinafine/Ketoconazole patch；ketoconazole；terbinafine hydrochloeide；HPLCI目 录摘要 I关键词：I1 前言12 仪器与试药

6、42.1 仪器42.2 试剂与试药43 方法与结果53.1 色谱条件53.2 混合对照品储备液的制备53.3 供试品溶液的制备53.4 阴性对照溶液的制备53.5 系统适用性试验53.6 线性关系考察73.7 重复性试验83.8 精密度试验93.9 稳定性试验103.10 加样回收率试验113.11 样品含量测定124 讨论124.1 样品处理的方法124.2 检测波长的选择124.3 流动相的选择125 结论13参考文献14综述15透皮贴剂的研究进展15致 谢241 前言 透皮吸收贴剂是经皮给药系统（transdermal therapeutic system or transdermal

7、drug delivery systems，简称TTS）之一，作为未来药物剂型开发的重点方向，是指通过皮肤给药，使药物通过皮肤各层进人体循环并达到有效血药浓度，从而产生全身或局部的治疗作用，实现疾病治疗或预防的一类制剂1。中国是世界最早使用透皮吸收制剂的国家，中医外治法(即“经皮给药”）源远流长，中医典籍黄帝内经中早在公元前二世纪已有关于外治法的相关记载2，透皮给药技术是中医外治法之一，清代名医徐洄溪曾对经皮吸收制剂有过如此阐释：“汤药不足尽病，人之疾病，由外入内，其流行于经络脏腑，必服药乃驱之，若其病既有定所，在皮肤筋骨之间可按而得者，用膏药贴之，闭塞其气，使药性从毛孔而入其腠理，通经贯络，

8、或提而出之，或攻而散之，较之服药尤有力，此至妙之法也。”中国传统的透皮吸收制剂大部分表现为膏药的形式，如黑膏药和白膏药，主要用于冶疗跌打损伤、风湿疼痛、骨质增生以及关节疼痛等病症，如狗皮膏、麝香壮骨膏、伤湿止痛膏、消痛贴膏 (原奇正消痛贴)等。但现代的透皮吸收制剂在制作方法、所用基质材料和用途范围等方面与传统的膏药有极大差别，绝大部分的透皮吸收贴剂都是以压敏胶作为药物储库，其中压敏胶起着保证释药面与皮肤紧密接触以及药库、调节药物释放等作用3。作为透皮贴剂的关键因素，压敏胶基质一般具有良好的黏附性能，使贴剂能够与皮肤表面牢固而柔软地密接，易于剥离，对药物要有理想的溶解度，在固定面积条件下，能提供

9、足够的经皮流率和足够长时间的载药量。选择压敏胶的依据包括药物在压敏胶基质中的溶解度，分散系数和渗透系数，目前用于透皮贴剂的压敏胶类型有聚异丁烯压敏胶、热熔型压敏胶、聚丙烯酸酯压敏胶和硅酮压敏胶等。透皮吸收系统的有效性主要表现为：皮肤是人体最大的器官，而人体的皮肤组织中存在着极为丰富的毛细血管网，全身血循环有1/3在皮肤进行，药物通过皮肤表层后，可以很快被吸收进入血液循环，对于口服给药吸收效果很差或者会对肝脏等产生毒副作用的药物而言，透皮给药是非常理想的药方式。正常人的皮肤由表皮，真皮及皮下脂肪组织三部分组成，表皮在皮肤的最外层，从外到里依次为生发层，颗粒层，透明层和角质层，表皮内无血管，因此药

10、物在表皮内不能被吸收；真皮内有丰富的毛细血管、淋巴管、神经、皮脂腺、毛囊及汗腺等；皮下脂肪组织在真皮之下，其中有许多血管、淋巴管和汗腺。真皮和皮下脂肪组织对药物穿透的阻力小，药物进入真皮及皮下脂肪组织后容易被毛细血管及淋巴管所吸收。透皮吸收制剂中药物经皮吸收的机制主要包括三个环节，分别是释放，渗透以及吸收进入血液循环三个阶段，其中释放是指药物从基质中脱离出来并扩散到皮肤或黏膜表面；渗透是指药物通过表皮进入真皮，皮下组织，对局部组织起治疗作用；吸收是指药物通过皮肤微循环或与黏膜接触后通过血管或淋巴管进入体循环而产生全身作用。现代研究表明：药物的经皮吸收主要通过3条途径，分别为：完整的表皮，表皮具

11、有类脂膜性质，脂溶性药物可以非解离型通过皮肤，但解离型药物则难以通过，一般认为药物的主要吸收途径为角质层细胞及其细胞间隙；毛囊和皮脂腺，毛囊、皮脂腺开口于表皮，进入毛囊口及皮脂腺的药物能通过毛囊壁及皮脂腺到达真皮或皮下组织，皮脂腺分泌物是油性的，有利于脂溶性药物透过皮肤；汗腺，大分子药物和离子型药物可以通过汗腺及毛囊。皮脂腺途径转运，当药物达到平衡后，该途径的作用就显得很微弱。与传统的给药途径相比，透皮吸收制剂具有许多优点，如可以通过恒定速率持续释放药物来延长有效作用时间，从而减少给药频率；皮肤间层兼具储库作用，可以避免药物浓度的峰谷现象，维持最佳血药浓度，并减少由血浆峰浓度造成的不良反应；皮

12、肤所含蛋白水解酶较少，药物所处环境稳定；避免药物通过胃肠道时遭受各种因素的影响而被破坏，或者避免某些药物对胃肠道所产生的副作用；免除肝脏内酶对药物的代谢分解作用即首过效应，同时避免了某些肝毒性较大的药物对肝脏的损害，如许多抗癌药物在使用较大剂量时会产生不良副作用，比如肝脏毒性等4，由于经皮给药可以避免首过效应，因此，通过经皮给药，减少给药剂量的方法，可降低抗癌药物对人体全身的毒性；由于神经系统位于皮下大约l00nm处，在此部位之上导入药物没有疼痛感，透皮给药系统能够实现无痛注射；除上述几点以外，透皮吸收制剂还具有便于携带，可自主用药，使用方便，可随时中断用药，减少给药次数等优点。过去，皮肤用药

13、主要用于治疗皮肤局部疾病，但随着1981年美国FDA批准了NovartisConsumerHealth公司生产的抗晕药东莨菪碱贴剂生产上市后，透皮吸收制剂近年来已经逐渐成为制药工业领域的研究热点，目前国际上竞相生产透皮吸收制剂的公司就有数十家，涉及的品种有几十个，正在研究准备上市的品种有数百种，治疗领域主要涉及疼痛、心脑血管疾病、激素替代治疗、帕金森氏综合症、儿童多动症等，比较知名的透皮贴剂有治疗慢性疼痛的芬太尼贴剂，治疗炎症的双氯芬酸二乙胺透皮贴剂，治疗神经性疼痛的利多卡因贴片，治疗夜间哮喘的妥洛特罗贴剂等。我国对透皮贴剂的开发起步较晚，国内比较知名的贴剂有云南白药创可贴，可用于小面积外创伤

14、口的止血，镇痛，消炎，透气和愈创，其他常见的贴剂产品有小儿退热贴、硝酸甘油贴剂、可乐定贴剂等。但由于中药多为复方用药，药味较多、成分比较复杂、有效成分不明确且含量较低 、专一性较差5，目前我国在透皮吸收制剂工艺方面的研发远远落后于欧美国家，但随着石油化工，高分子材料的迅速发展，近年已经发展出许多新的基质和新的辅料，而且国内对于透皮技术和药物透皮吸收机制的研究也日益深入，中药透皮贴剂的研究开发得到了快速发展，国内通过对如青蒿琥酯6、磷酸川芎嗪7等药物的透皮实验研究，对其透皮吸收的规律以及释药机制进行了探讨，同时对透皮促进剂的选择等方面进行了考察，取得了良好的效果，国内应用于临床的中药贴剂品种越来

15、越多，质量与应用也不断提高与扩大，常用的有如舒妇贴膏、消痛贴膏、消肿止痛贴、丁桂儿脐贴等。复方盐酸特比萘芬压敏胶贴剂是由盐酸特比萘芬和酮康唑组成的透皮吸收制剂，主要用于甲真菌病的治疗。其中特比萘芬属于丙烯胺类抗真菌药，其药理作用机制为高选择性抑制真菌角鲨烯环氧化酶8，能特异性地干扰真菌麦角固醇的早期生物合成，从而使真菌细胞膜形成过程中角鲨烯环氧化反应受阻，达到杀灭或抑制真菌的作用，常用于治疗股癣、头癣、甲癣等皮肤疾病9，酮康唑属咪唑类抗真菌药，该品的药理作用机制主要为高度选择性干扰真菌的细胞色素P-450的活性，从而抑制真菌细胞膜上麦角固醇的生物合成，使真菌细胞膜结构破坏，达到抗真菌作用10，对皮真菌、酵母菌（念珠菌属、糠秕孢子菌属、球拟酵母菌属、隐球菌属）、双相真菌和真菌纲有抑菌和杀菌作用。两者联合用药，可以扩大抗菌谱，使抗真菌疗效更为显著11,12，做成经皮给药剂型后，酮康唑和盐酸特比萘芬可经皮肤直接吸收，无肝脏首过效应，药物利用率高，吸收速率稳定，具有使用方便、安全性好、作用迅速、给药剂量小、患者依从性好等优点13。目前尚未有同时测定盐酸特比萘芬压敏胶贴剂中盐酸特比萘芬和酮康唑的报道，本研究采用