1、无患子的质量标准研究摘要:目的 无患子为无患子科无患子Sapindus mukorossi Gaertn的干燥果实，无患子具有清热祛痰、消积杀虫之功效，主治喉痹肿痛、肺热咳喘、疳积、癣疾、肿痛等，民间多用其果实代肥皂用。目前有许多医院和企业都有应用到无患子这种中药制作药物用于治疗疾病。本次研究的目的是建立可靠的无患子质量标准，使在对此药物进行检验的时候有可靠的标准进行参考及操作；方法 本次研究采用对粉末显微特征的观察，药材提取物中三萜皂苷的薄层色谱的鉴定，药物水分、灰分、浸出物的标准确立这几个方面对无患子这个中药进行质量标准的研究；结果 得出可靠的无患子质量标准的相关实验结果与数据；结论 本论
2、文的无患子质量标准研究方法可供以后药物检验参考使用。关键词：无患子；三萜皂苷；显微特征；薄层色谱Study on Sapindus mukorossi GaertnAbstract: Objective Sapindus mukorossi Gaertn is belong to the Sapindaceae plant. Sapindus have the function of heating expectorant, consumer product insecticidal efficacy, indications Houbi throat, Hyperactivity cough
3、, malnutrition, ringworm disease, pain and so on. This quality standard research will study on Sapindus mukorossi Gaertn to establish standards of itself. Methods This quality standard study will use the Microscopic identification, TLC and the Determination of moisture, ash, extract to establish sta
4、ndards of Pyracantha fortuneana (Maxim.) Li. Results Obtain reliable standard quality-related data and results. Conclution This quality standard research methods are available for future use and reference drug testing.Keywords: Sapindus mukorossi Gaertn ， Microscopic identificatio， TLC，Determination
5、 of moisture, ash, extractI目 录摘要-1前言12材料与仪器22.1 材料22 .2仪器23实验方法33.1无患子粉末显微特征33.2无患子薄层色谱鉴别43.3无患子水分测定43.4无患子总灰分测定43.5无患子浸出物测定44结果54.1无患子粉末显微特结果54.2无患子薄层色谱结果74.3无患子水分测定结果94.4无患子总灰分测定结果104.5无患子浸出物测定结果105讨论115.1其他薄层板考察情况115.2酸不溶性灰分考察情况125.3实验研究总结13参考文献15综述16致谢231前言无患子(Sapindus mukorossi Gaertn)为无患子科无患子属
6、的一种落叶大乔木，其中又患子，油患子，黄目树，洗手果，目琅树，苦患树，油萝树等都是无患子的别名。我国长江流域以南地区及台湾省无患子的主要分布地区，同时无患子在也朝鲜、日本、印度等地区有栽培。同时有研究发现无患子植株能够对二氧化硫有比较好的抵抗能力1。因此在工业城市的生态绿化项目中无患子一般都是优先选用的树种之一。56年是无患子植株一般的成长期，它通常是一年结果一次，并且无患子植株生长速度比其他树种都要快，因此它是属于易以种植养护的树种。无患子属于一种寿命长的数木，以为内它的寿命一般有100200年。无患子在中医中药学中归为寒凉，它的味道比较苦，也具有一点毒性。它具有的药效表现为清除湿热祛除痰脓
7、、帮助消化杀灭寄生虫，因此在治喉咙麻痹肿痛、因肺热引起的咳嗽、皮肤肿毒、癣疾等病症的时候也会使用到无患子。在市场上很多时候都会用无患子果实代替肥皂来使用，而且现在有不少医院和企业都有应用到无患子这种中药制作药物用于治疗咳嗽等疾病。但可惜的是目前还没有确定的无患子质量标准，因此建立可靠的无患子质量标准，有助于对无患子制成的药物或日用品进行检验的时候有可靠的标准进行参考及操作。无患子的种仁含有丰富的油脂，可以作为一种制备生物柴油的新型原料2。无患子皂苷是无患子果皮化学成分中主要组成部分，它的总含量一般约为533 J3。电喷雾串联质谱法、高效液相色谱一质谱联用法是李锐等研究对无患子总皂苷中不同成分进
8、行分析的时候采用的方法，三萜皂苷是经过研究最后确定为无患子中主要成分，同时存在倍半萜皂苷，四环三萜皂苷类大戟烷型，五环三萜皂苷类的齐墩果酸型和达玛烷型等物质4。后来一种以前没被发现的的无环倍半萜在SUN等5的研究从无患子果皮中分离得到了。再后来sapinmusaponins A，B,C,D,E 共五种新的没被发现的达玛烷型三萜皂苷也同时在KUO等的研究中从无患子果实中分离得到，同时研究也发现对肿瘤细胞具有细胞毒性并且起到抑制肿瘤细胞作用的为其中的A、C、D、E这四种达玛烷型三萜皂苷6。K，L，M,N等4种新的齐墩果酸型三萜皂苷、sapinmusaponins F,G,H,I,J共5种新的大戟烷
9、型的三萜皂苷、O，P 2种新的达玛烷型的三萜皂苷叶都在HUANG等的研究中从无患子果实中分离出来了，其中对肿瘤细胞具有细胞毒性并且起到抑制肿瘤细胞作用的是以常春藤皂苷元为苷元的10种齐墩果酸型的三萜皂苷，同时在研究发现具有抗血小板聚集效果等药理学作用的是大戟烷型三萜皂苷7。目前市场上尚未有关于检查无患子质量的明确的标准，这往往使市场上的用无患子制作的医药产品出现质量参差不齐，轻则影响疗效，重则可能会对服用药物的人造成不良的健康问题。故建立可靠有效的无患子质量标准是十分迫切及必须的。一旦建立起可靠的无患子质量标准，就可以有助于对市场上此类产品的质量标准进行规范及监督。2材料与仪器2.1材料无患子
10、的果实是类球形的，它的直径一般为2-2.5厘米。无患子外果皮颜色呈棕褐色，在晒干后果皮会皱缩同时出现蜡状的光泽；柔韧的肉质，甚至黏稠如胶一般是无患子的中果皮的特点；在质地为膜质，不完全透光的内果皮的表面种子着生的地方有着白色的绒毛。无患子种子较为光滑，表面黑色，种皮为骨质，没有假种皮，种子呈线形种脐。种子有两枚肥厚，叠生的子叶，颜色为黄色，背面较大的一枚半抱腹面的另外一枚；种子的稍弯曲而且粗短8。根据收集到的样品5批，性状按实际样品进行描述，描述特征如正文。表2-1 样品表序列号药材名称药材批号出产地方样品采样时间1无患子20140516广东2014年2无患子20140610广东2014年3无
11、患子20140225广东2014年4无患子20140630广东2014年5无患子20140311广东2014年2.2仪器粉末显微特征鉴别用仪器：生物显微镜（型号：C020172)薄层色谱所用的仪器：普通硅胶G预制板（德国默克有限公司制作，批号：604115，规格：100*200mm），普通硅胶G预制板（青岛海洋化工厂分厂制作，批号：20081211，规格：100*200mm），人工手铺普通硅胶G板（规格：100*200mm），佳能照相机，半自动点样器（型号：Linmat 5），层析缸；水分，灰分等质量标准所用仪器：电热恒温干燥箱（型号：DG20-02），METTLER TOLEDO电子天平，马
12、弗炉（型号：TM0910），坩埚若干,扁形称量瓶若干；3实验方法3.1 无患子粉末显微特征收集到的样品5批进行实验，并用采集无患子对照药材进行比对与实验。根据收集到的样品5批进行粉末的显微鉴别特征进行描述。3.2 无患子薄层色谱鉴别本次标准研究的薄层鉴别是三萜类进行研究9，硅胶G板为实验用薄层板，点样时供试品溶液与对照品药材溶液点样量为5l，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）的展开比例混合后将溶液在温度为10以下的条件下静置再拿下层溶液作为展开剂使用，显色剂是10%硫酸乙醇溶液，在温度为105下烘五分钟至斑点显色清晰，在日光下观察。实验如下：3.2.1 供试品溶液的制备取
13、无患子粉碎后过四号筛的粉末1g，加入10ml乙醇，在常温下超声提取30分钟，过滤后取滤液，滤液水浴蒸干，用2ml的乙醇溶解残渣，作为供试品溶液。3.2.2 对照品溶液制备称取无患子果对照药材1g，按照上面提取的方法制成无患子对照药材溶液。3.2.3 薄层色谱点样量考察取供试品溶液，分别以2、5、10、15、20l的点样量进行实验，再用显色剂10%硫酸乙醇溶液喷板，然后在105下烘5分钟至斑点显色清晰检视。3.2.4 薄层色谱湿度考察取供试品溶液和对照品溶液点样于同一薄层板，分别在用硫酸调节相对湿度18和88的条件下展开，再用显色剂10%硫酸乙醇溶液喷板，然后在105下烘5分钟至斑点显色清晰检视
14、。3.2.5 薄层色谱温度考察取供试品溶液和对照品溶液点样于同一薄层板，分别在温度为5和19的条件下展开，再用显色剂10%硫酸乙醇溶液喷板，然后在105下烘5分钟至斑点显色清晰检视。3.2.6 薄层色谱薄层板考察取供试品溶液和对照品溶液点样于不同牌子的普通硅胶G板，再用显色剂10%硫酸乙醇溶液喷板，然后在105下烘5分钟至斑点显色清晰检视。3.3 无患子水分测定2010板中国药典一部中水分测定的第一法是本次实验选用来测定无患子水分的方法，取无患子供试品2g左右,在干燥至恒重的扁形称量瓶中平铺为厚度不超过5mm的薄层,再在电子天平中精密称定扁形称量瓶与粉末的总重量，然后在105条件打开瓶盖干燥5
15、小时，在取出前将扁形称量瓶的瓶盖盖好，并迅速将其移置干燥器中，再干燥器中冷却30分钟后，迅速把装有样品的瓶子取出置于电子天平中精密称定。再在温度为105条件干燥1小时，待冷却后如上述的方法称重，直到连续两次称重的差异不超5mg为止。根据瓶加样品称重的结果与恒重的扁形称量瓶的质量相减得出减失的重量，用减失的重量除于粉末的质量最后计算出供试品中水分的含量（）103.4 无患子总灰分测定2010板中国药典一部中总灰分测定的方法是本次实验选用来测定无患子总灰分的方法，取粉碎后能通过二号筛的无患子粉末，取混合均匀的无患子供试品3g左右，将粉末放入已经做恒重处理的坩埚之中，在电子天平中称量粉末与坩埚的总质量，再将其置于马弗炉内缓缓炽热，同时注意避免粉末在坩埚中燃烧起来，直到粉末被灼伤至完全碳化之后，再逐渐升高马弗炉温度到600，灼烧6小时使无患子样品得到完全灰化，再测量残渣与坩埚的重量。再在温度为600的马弗炉中灼烧6小时，待冷却后如上
